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土壤氨基糖實(shí)驗(yàn)流程如下：一、實(shí)驗(yàn)方法及原理氨基糖在吡啶-甲醇溶液中,以 4-二甲氨基吡啶為催化劑的條件下與鹽酸羥胺和乙酸酐發(fā)生糖腈乙酰酯反應(yīng), 所得衍生物可利用氣相色譜測定。二、實(shí)驗(yàn)步驟2.1主要實(shí)驗(yàn)儀器? ?GC（毛細(xì)管分流進(jìn)樣口， FID檢測器）鼓風(fēng)烘箱（涵蓋105℃，可定時(shí)8h）渦旋混合儀（2850rpm）離心機(jī)（50mL，3650rpm）冷凍干燥機(jī)水浴鍋（45℃、80℃）旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（100mL，65℃）離心機(jī)（5mL，8000rpm）2.2 實(shí)驗(yàn)步驟1、水解：稱取約0.5~1.0g的土樣于水解管中，沿管壁加入5 mL 6 mol/L鹽酸，用氮?dú)庵脫Q水解管中空氣2min后密封。在烘箱中105℃放置8h水解。2、凈化：a) 除酸：待水解液冷卻至室溫后，加入200μgN-甲基氨基葡萄糖（1mg/mL水溶液，200μL）。渦旋儀震蕩30s混勻。取部分水解液于5mL離心管中，于8000rpm離心1min。取上清液2.5mL于50mL離心管中用氮?dú)庥?5℃吹干。用25mL純水溶解吹干后的殘?jiān)?。?.4mol/LKOH和0.01mol/LHCL調(diào)節(jié)pH至6.6~6.8。b) 除鹽：離心管以3000rpm離心5min，轉(zhuǎn)移出上清液于100mL茄型瓶中，于65℃，25rpm旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干。再加入10mL無水甲醇分兩次溶解瓶中殘?jiān)：筠D(zhuǎn)移至另一50mL離心管。氮吹至...

發(fā)布時(shí)間: 2024 - 07 - 15

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土壤中有機(jī)氮組分的測定

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發(fā)布時(shí)間： 2022 - 05 - 05

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今天給大家分享一下如何用酸水解-蒸餾法測定土壤中有機(jī)氮組分（氨基酸態(tài)氮、氨基糖態(tài)氮、酸解銨態(tài)氮、酸解總氮）。操作步驟如下:·1)土壤水解液的制備:稱取適量過0.25mm篩的土壤樣品，放入具有磨口接頭的三角瓶中，加入2滴正辛醇和20ml和6ml的HCI，搖動(dòng)瓶子使土壤和酸液充分混勻，將瓶子放入有溫控功能的遠(yuǎn)紅外消煮爐中，在瓶口裝上有玻璃磨口接頭的冷凝管，接通冷凝水，打開電源開關(guān)，使溫度控制在120±3℃，在回流條件下使土壤--酸混合液慢慢沸騰12小時(shí)。水解結(jié)束后，用中速藍(lán)帶濾紙將樣品趁熱過濾，濾液收集在100ml的燒杯中，用去離子水少量多次沖洗殘?jiān)?，使濾液體積達(dá)到約6Oml。將盛有濾液的燒杯放在碎冰塊中，借助PH計(jì)，逐滴慢慢加入5mol/L NaOH溶液，邊加邊攪拌，直到水解液的pH達(dá)5左右，再用0.5mol/L的NaOH進(jìn)行中和，使水解液的pH達(dá)6.5±0.1，用小漏斗把酸解液轉(zhuǎn)移到I00ml容量瓶中，定容至刻度。2)酸解液中氮素形態(tài)的測定(1)酸解液全氮的測定:取樣前，先倒轉(zhuǎn)容量瓶幾次，使懸浮液均勻，并用末端較寬的移液管吸取5ml酸解液，放入消煮管中，加入0.5克定氮混合催化劑和2ml濃硫酸，380℃溫度下消煮1.5小時(shí)。冷卻后將消煮管連接到定氮儀上，加10ml 10mol/L NaOH，蒸餾約4分鐘，流出液用硼酸吸收，蒸餾結(jié)束后用0.0055 mol/L H2SO4滴定。(2)銨態(tài)氮的測定取10ml已中和的酸水解液，放入消煮管中，加入2mL 3.5%的MgO懸浮液，立即連接蒸餾裝置，蒸餾約2分鐘后滴定。(3)氨基糖態(tài)氮的測定取已中和的酸水解液10ml于消煮管中，加入10ml磷酸一硼酸緩沖液(PH11.2)，連接蒸餾裝置，蒸餾4分鐘，滴定。此測定結(jié)果減去銨態(tài)氮，即為氨基糖態(tài)氮。(4)氨基酸態(tài)氮的測定取5ml已中和的酸水解液于消煮管中，加入1ml 0.5mol/L NaOH溶液，在沸水中加熱直到溶液減至2-3ml，取出冷卻，加入0.5g檸檬酸和0.1g茚三酮，將消煮管放回沸水浴中，加熱1分鐘后，旋轉(zhuǎn)消煮管(不放開水浴)3分鐘，再在水浴中保持9分鐘，取出冷卻后，加入10ml磷酸--硼酸緩沖液和1ml 5mol/L NaOH，蒸餾4分鐘，滴定。(5)未知態(tài)氮= 水解總氮- (銨態(tài)氮+氨基糖態(tài)氮+氨基酸態(tài)氮)(6)非水解氮= 土壤總氮-水解液總氮

土壤中碳酸根、碳酸氫根的測定（中和滴定法）

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發(fā)布時(shí)間： 2022 - 04 - 27

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方法原理:第一步在待測液中加入酚酞指示劑，用標(biāo)準(zhǔn)酸滴定至溶液由紅色變?yōu)闊o色(PH8.3)，此時(shí)CO32-只被中和為HCO3-;第二步加入甲基橙指示劑，繼續(xù)用標(biāo)準(zhǔn)酸滴定至溶液由黃色變?yōu)槌燃t色(PH3.8)，此時(shí)溶液中原有的HCO3-和第一步由CO32-生成的HCO3-全被中和為CO32-。由標(biāo)準(zhǔn)酸的兩次用量可分別求得土壤中CO32-和HCO3-的含量。儀器及試劑:往復(fù)式電動(dòng)振蕩機(jī);漏斗;廣口瓶，500ml;具塞三角瓶，500ml去除二氧化碳的水:將蒸餾水煮沸15min，冷卻后立即使用；硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液:吸取28mL濃硫酸(p=1.84)加入1L去二氧化碳水中，此溶液濃度約為0.lmol/L硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液。將此溶液用碳酸鈉標(biāo)定后，準(zhǔn)確稀釋5倍，即為c(1/2H2S04)=0.02mol/L的硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液；0.5%(m/v)酚酞指示劑:稱取0.5g酚酞溶于100ml50%(v/v)乙醇溶液.0.1%(m/v)甲基橙指示劑:稱取0.1g甲基橙溶于100mL水中.分析步驟:（1）稱取過2mm孔徑篩的風(fēng)干試樣50g(精確至0.01g),置于500mL廣口瓶(礦泉水瓶)中，加250mL去除CO2的水，用橡皮塞塞緊瓶口，在振蕩機(jī)上振蕩3min，立即過濾，開始濾出的10mL濾液棄去，以獲得清亮的濾液，加塞備用。電導(dǎo)、CO32-、HCO3-等項(xiàng)測定應(yīng)立即進(jìn)行，其他離子的測定亦應(yīng)在當(dāng)天完成。（2）吸取試樣待測液25.00mL放入150mL三角瓶中，加入酚酞指示劑2滴，如待測液不顯紅色，表示沒有CO32-存在，如溶液顯紅色，用硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至紅色剛消失為止，記錄所用硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積(V1)。在滴定過的溶液中加入甲基橙指示劑2滴，用硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至由黃色轉(zhuǎn)變成明顯的橙紅色為止。記錄加甲基橙后滴定所用硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積(V2)。結(jié)果計(jì)算:CO32-(g/kg)=2V1×C×D×1000/m×0.030HCO3-(g/kg)=(V2-V1)×C×D×1000/m×0.061C--硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度;D--分取倍數(shù)，250/25;M--稱取試樣質(zhì)量，g

植物葉綠素、類胡蘿卜素的測定方法

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發(fā)布時(shí)間： 2022 - 04 - 26

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一、?實(shí)驗(yàn)原理和目的? ???根據(jù)朗伯—比爾定律，某有色溶液的吸光度A與其中溶質(zhì)濃度C和液層厚度L成正比?。?葉綠素和類胡蘿卜素在95%的乙醇提取液中的最大吸收峰波長不同，葉綠素(95%乙醇)在665nm、649nm，類胡蘿卜素在470nm有最大吸收峰，根據(jù)在分光光度計(jì)下測定的吸光度，求得葉綠素及類胡蘿卜素的含量。二、?實(shí)驗(yàn)器具和步驟??實(shí)驗(yàn)器具：分光光度計(jì)（UV-1800PC，上海美普達(dá)儀器有限公司）、電子天平（ES-J220，天津市德安特傳感技術(shù)有限公司）、研缽、?試管、小漏斗、濾紙、吸水紙、?移液管、量筒、剪刀? ；試劑：?95％乙醇（或80％丙酮）、石英砂、碳酸鈣粉；?步驟：1.稱取剪碎的新鮮樣品0.1g?左右，放入研缽中，加少量石英砂和碳酸鈣粉及3～5ml?95％乙醇，研成均漿，繼續(xù)研磨至組織變白，靜置3～5min?。2.?取濾紙1張，置漏斗中，用乙醇濕潤，沿玻棒把提取液倒入漏斗中，過濾到10ml試管中，用少量乙醇沖洗研缽、研棒及殘?jiān)鼣?shù)次，最后連同殘?jiān)黄鸬谷肼┒分小?3.用滴管吸取乙醇，將濾紙上的葉綠體色素全部洗入漏斗中。直至濾紙和殘?jiān)袩o綠色為止。最后用乙醇定容至10?ml?，搖勻。4.把葉綠體色素提取液倒入光徑1cm的比色杯內(nèi)。以95％乙醇為空白，在波長665nm、649nm、470nm下測定吸光度?計(jì)算公式：??Ca=13.95A665－6.88A649；?Cb=24.96A649－7.32A665???Cx=(1000A470-2.05Ca-114.8Cb)/245更多相關(guān)訊息so栢暉生物

關(guān)于碳組分，你都了解嗎？

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發(fā)布時(shí)間： 2022 - 04 - 22

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今天，栢暉從有機(jī)碳/無機(jī)碳、有機(jī)碳的來源、有機(jī)碳的分類幾方面和大家聊聊“碳”。首先，碳分為有機(jī)碳和無機(jī)碳。有機(jī)碳諸如總有機(jī)碳、可溶性有機(jī)碳、易氧化有機(jī)碳；無機(jī)碳則有碳酸根、碳酸氫根、碳酸鹽。從有機(jī)碳的來源來看，可以分為植物有機(jī)碳和微生物。植物有機(jī)碳可分為脂類、角質(zhì)+軟木脂、木質(zhì)素；微生物則分為活體微生物和微生物殘?bào)w，具體如下：按組分分類可以從粒級(jí)、活性、密度三個(gè)角度來看。按粒級(jí)分類可分為顆粒有機(jī)碳和礦物結(jié)合態(tài)有機(jī)碳，按活性分類可分為活性有機(jī)碳、中間碳、惰性有機(jī)碳，從密度來看可分為輕組有機(jī)碳和重組有機(jī)碳，詳情如下：以上指標(biāo)均可測定，歡迎廣大科研學(xué)者分享交流更多指標(biāo)分類方式及測定方法。

文獻(xiàn)解讀| 微生物資源限制和模擬代謝活性沿海拔梯度的變化規(guī)律

作者：

發(fā)布時(shí)間： 2022 - 04 - 20

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原名：Resource limitation and modeled microbial metabolism along an elevation gradient譯名：微生物資源限制和模擬代謝活性沿海拔梯度的變化規(guī)律期刊：CatenaIF：5.198發(fā)表時(shí)間：2021.10第一作者：Zhang, SH摘要土壤微生物對(duì)全球碳—?dú)夂蚍答伨哂兄匾绊懀瑫r(shí)其代謝活性通常受到養(yǎng)分有效性的限制。海拔變化對(duì)土壤微生物群落具有重要影響，但其對(duì)微生物資源限制的影響及其對(duì)碳動(dòng)態(tài)的調(diào)控機(jī)制尚未闡明。本研究中，我們在秦嶺（Qinling Mountains）沿海拔梯度從1308 – 2600 m之間設(shè)置了6個(gè)梯度進(jìn)行土壤取樣，通過測定和計(jì)算胞外酶化學(xué)計(jì)量比并模擬微生物代謝以揭示土壤微生物沿海拔梯度的資源限制特征和主要代謝過程（如：有機(jī)碳分解速率和微生物呼吸速率）的變化規(guī)律。還測定了年平均氣溫（MAT）、年平均降水量（MAP）、土壤總C:N:P比值、土壤有效養(yǎng)分以及微生物生物量等環(huán)境指標(biāo)。結(jié)果表明：該地點(diǎn)的土壤微生物均受到N限制，并且隨著海拔升高，土壤微生物N限制顯著增強(qiáng)。隨著海拔升高，有機(jī)碳分解速率（M）和微生物呼吸速率（Rm）顯著降低。這表明，由海拔變化引起的溫度升高可能緩解了微生物N限制并導(dǎo)致土壤C釋放增加。冗余分析（RDA）表明，MAT和土壤養(yǎng)分化學(xué)計(jì)量比（尤其是DOC:TDN）是解釋土壤微生物資源限制特征和主要代謝過程沿海拔梯度變化的主要環(huán)境因子。綜上，本研究表明，由于土壤C:N比值的變化，高海拔地點(diǎn)的微生物遭受更強(qiáng)的N限制，可能有利于土壤有機(jī)碳積累，該結(jié)果為氣候變暖背景下微生物介導(dǎo)的土壤C釋放過程提供了見解。研究背景溫度是微生物代謝過程的主要驅(qū)動(dòng)因子并決定了微生物利用養(yǎng)分的能力。因此，了解微生物過程如何響應(yīng)溫度變化，對(duì)于預(yù)測氣候變化對(duì)微生物養(yǎng)分獲取的影響具有重要意義。隨著海拔升高，環(huán)境溫度下降，因此沿海拔梯度取樣有助于闡明微生物養(yǎng)分獲取和代謝特征對(duì)溫度變化的響應(yīng)機(jī)制。盡管一些研究已經(jīng)表明微生物特性對(duì)海拔引起的溫度變化響應(yīng)十分敏感，而這種響應(yīng)直接受到海拔變化引起土壤養(yǎng)分有效性變化的影響。但海拔變化對(duì)微生物資源限制和代謝特征的具體影響機(jī)制還未闡明。為了理解微生物資源的限制和微生物代謝過程，并揭示其沿海拔梯度變化的潛在機(jī)制，我們在中國太白山（Taibai Mountain of China）進(jìn)行了沿海拔梯度的土壤取樣。并提出以下假設(shè)：1.該地區(qū)的土壤微生物可能受到N和P限制的影響，且N和P限制相對(duì)影響可能隨著海拔變化而變化；2.土壤微生物資源限制和主要微生物過程可能受到氣候因...

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