1.0.3%的過氧化氫溶液：將30%過氧化氫稀釋100倍。?
2.3N硫酸：吸取10mL鹽酸用蒸餾水稀釋至50ml。
3.0.1N高錳酸鉀溶液：1.58g高錳酸溶于100ml水。??
萬分之一分析天平、震蕩器、滴定管、試管夾
取新鮮的實驗室待測樣品充分混勻后，按四分法縮減至100g，粉碎，然后全部通過10目孔徑篩，裝入樣品袋備用。
1.稱取2g試樣于50ml離心管中，加40ml蒸餾水，5ml0.3%過氧化氫溶液于震蕩機(jī)震蕩20min，取出后加入5ml3N硫酸，過濾后取25ml濾液與150ml三角瓶中，用0.1N高錳酸鉀滴定至淡粉紅色。
2.空白：不加土樣, 其他操作與樣品試驗相同。
?過氧化氫酶活性=?(V-VS)C×51/V0×17/W
?V：為滴定空白所用的KMnO4體積；
?VS：為滴定樣品所用的KMnO4體積；
?C: 為KMnO4濃度；
?V0：為滴定體積25ml；
?W：為土重；
? ? ?1.1%鄰苯三酚溶液：稱取1g鄰苯三酚，用蒸餾水融至100ml。? ? ?2.0.5%H2O2溶液：取1ml30%H2O2稀釋至60ml。? ? ?4.0.5mol/L HCL：吸4.17mL的濃鹽酸溶于100mL水。? ? ?5.PH4.5檸檬酸磷酸緩沖溶液:0.1mol/L檸檬酸溶液: 19.2g C6H7O8溶至1L。0.2mol/L磷酸氫二鈉溶:53.63gNa2HPO4.7H2O或者71.7g Na2HPO4.12H20溶至1L。取10.65ml檸檬酸和9.35mINa2HPO4混勻(用量較多可以乘以倍數(shù)配制)，之后再用這兩種溶液調(diào)節(jié)PH即可。? ? ?6.重鉻酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液：0.75g重鉻酸鉀溶于1L0.5mol/LHCL溶液中。此時的溶液相當(dāng)于50ml醚中含有5mg紫色沒食子素。? ? 萬分之一分析天平、恒溫?fù)u床、分光光度計
? ? ?取新鮮的實驗室待測樣品充分混勻后，按四分法縮減至100g，粉碎，然后全部通過10目孔徑篩，裝入樣品袋備用。
稱取試樣1g，精準(zhǔn)至0.001g，置于50ml離心管中，然后注入10m1%鄰苯三酚溶液和2ml0.5%H2O2溶液。震蕩后放置30°C恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)2小時。取出待測。
除不加待測樣品外，應(yīng)用的試劑和步驟操作同4.1。
除用10 mL蒸餾水代替基質(zhì)（鄰苯三酚溶液）外，應(yīng)用的試劑和步驟操作同4.1。
? ? ?4.標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制取重鉻酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液0、1、2、4、6、8ml于比色管中用0.5mol的HCL稀釋至50ml。定容后，在分光光度計。上于430nm處比色測定。以吸光度為橫坐標(biāo)，以濃度為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。?
試樣濾液加4mlPH4.5的檸檬酸-磷酸緩沖溶液，再加35ml乙醚， 用力震蕩數(shù)次，萃取30min。最后，將含溶解的紫色沒食子素的著色乙醚相比色。比色波長為430nm。為了防止因乙醚引起的誤差，每比色一次用無水乙醇洗滌比色槽一次。?
? ? ?過氧化氫酶活性，以2h后，1g土壤生成的紫色沒食子素毫克數(shù)表示。過氧化物酶活性= (a樣品-a空白-a無基質(zhì))?×V/m
a為標(biāo)曲上相對應(yīng)的濃度。
V為顯色體積，即為乙醚的體積35ml。
m為樣品重量g。
1.1% KNO3?溶液；
2.1%葡萄糖；
3.CaCO3?；
4.鋁鉀釩飽和液；
5.酚二磺酸：取3g重蒸酚與37g（21.0ml）濃硫酸混合，在沸水浴上回流加熱6h；
6.10% NaOH；
7.KNO3?標(biāo)準(zhǔn)液：精確稱取16.3052g重結(jié)晶KNO3?溶于蒸餾水中并稀釋至1L。使用前，將標(biāo)準(zhǔn)液再進(jìn)行稀釋100倍（1ml含0.1mgNO3---N）。
萬分之一分析天平，恒溫箱，水浴鍋，分光光度計
取新鮮的實驗室待測樣品充分混勻后，按四分法縮減至?100g，粉碎，然后全部通過10目孔徑篩，裝入樣品袋備用。?
取1g土壤置于100ml減壓三角瓶中，加20mgCaCO3?和1ml 1% KNO3?。仔細(xì)混合后，加1ml葡萄糖作為氫的供體，抽氣3min，稍搖蕩三角瓶，置于30℃恒溫培養(yǎng)24h。
培養(yǎng)結(jié)束后，加50ml水，1ml鋁鉀釩液。取20ml液移于磁皿上蒸干。加1 ml酚二磺酸處理10min。再加15ml蒸餾水，用10% NaOH調(diào)至微黃色，定容后于分光光度計上于400—500處進(jìn)行比色。
用滅菌土壤（180℃3h）代替試樣作對照，其余步驟同4.1。
除不加待測樣品外，應(yīng)用的試劑和步驟操作同4.1。
? ? ?4.標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制吸取50ml?KNO3?標(biāo)準(zhǔn)溶液，置于磁皿中，在沸水浴上蒸干，殘渣用2ml酚二磺酸處理10min。再加15ml蒸餾水，定容至500ml（1ml含0.01mgNO3---N））。吸取此溶液5-40ml于50ml容量瓶中，用10% NaOH調(diào)至微黃色，定容后于分光光度計上于400—500處進(jìn)行比色，以光密度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。