1、范圍：
本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了分光光度法測(cè)定水果、蔬菜及其制品中葉綠素含量的方法。
本標(biāo)準(zhǔn)適用于水果、蔬菜及其制品中葉綠素a含量、葉綠素b含量和葉綠素總含量的測(cè)定。
本標(biāo)準(zhǔn)方法中葉綠素a的線性范圍為0.004 mg/g ~0.018 mg/ g，葉綠素b的線性范圍為0.005mg/g~0.020mg/g。
2、原理：
試樣中的葉綠素用無(wú)水乙醇和丙酮1：1（V ：V）混合液提取，試液分別測(cè)定645nm和663 nm處吸光度值，利用Arnon公式計(jì)算試樣葉綠素含量。
3、試劑
除非另有說(shuō)明，所用水為（GB/T 6682 ?分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法）中規(guī)定的三級(jí)水及以上，試劑均為分析純?cè)噭?/span>
3.1無(wú)水乙醇。
3.2 丙酮。
3.3提取劑：無(wú)水乙醇和丙酮1：1(V：V)混合液。
4、儀器
4.1 分光光度計(jì)。
4.2分析天平(±0.01g)。
4.3高速組織搗碎機(jī)：0 r/ min~2 000r/ min。
5、分析步驟
5.1.1含水量較多的樣品
取代表性樣品，切碎，混勻，用組織搗碎機(jī)制成勻漿，備用。
5.1.2 含水量較少的制品
取代表性樣品，按1：1(m : m)的比例加入蒸餾水，用組織搗碎機(jī)制成勻漿，備用。
深綠色樣品、準(zhǔn)確稱(chēng)取0.5g試樣于三角瓶中，加人100 mL提取劑。綠色樣品，準(zhǔn)確稱(chēng)取0.5g試樣于三角瓶中，加入10mL提取劑。淺綠色樣品，稱(chēng)取2.0g~5.0g試樣于三角瓶中，加入10mL提取劑。三角瓶用封口膜密封，室溫下避光靜置提取5 h，過(guò)濾，濾液待測(cè)。
注意：光照和高溫會(huì)使葉綠素發(fā)生氧化和分解，試液制備時(shí)應(yīng)避免高溫和光照。
以提取劑為空白溶液，凋零點(diǎn)。分別在645nm和663nm處測(cè)定試液的吸光度值。
6、結(jié)果計(jì)算
試樣中葉綠素a含量、葉綠素b含量和葉綠素總含量均以質(zhì)量分?jǐn)?shù)w表示，單位為毫克每克（mg/g），分別按式（1）、式（2）和式（3）計(jì)算。
W1=（12.72×A1-2.59×A2）×v/（1000×m）.........（1）
式中：
W1------葉綠素a含量，單位為毫克每克（mg/g）；
A1------試液在663nm處的吸光值；
A2------試液在645nm處的吸光值；
v------試液體積，單位為毫升（mL）；
m------試液質(zhì)量，單位為克（g）。
計(jì)算結(jié)果保留3位有效數(shù)字。
W2=（22.88×A2-4.67×A1）×v/（1000×m）..........（2）
式中：
W2------葉綠素b含量，單位為毫克每克（mg/g）
計(jì)算結(jié)果保留3位有效數(shù)字。
W3=（8.05×A1+20.29×A2）×v/（1000×m）........（3）?
W3------葉綠素總含量，單位為毫克每克（mg/g）
計(jì)算結(jié)果保留3位有效數(shù)字。
7、精密度
在重復(fù)性條件下獲得的2次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不大于這2個(gè)測(cè)定值算術(shù)平均值的10%。