今天給大家分享一下如何通過比色法對Vc的含量進(jìn)行測定，如下：
一、試劑
所有試劑除注明者外，均為分析純。
1.?Vc標(biāo)準(zhǔn)液：準(zhǔn)確稱取抗壞血酸0.1000g，用配好的草酸-EDTA定容至100ml。
2.?草酸-EDTA：稱取含結(jié)晶水的草酸6.3000g，EDTA 0.0584g，充分溶解后定容至1000ml。
3.?偏磷酸-乙酸：稱取15.0000g偏磷酸于40ml乙酸中，定容至500ml，用濾紙過濾，取濾液備用。
4.?5%H2SO4：吸取5ml硫酸稀釋至100ml。
5. ?5%鉬酸銨：準(zhǔn)確稱取鉬酸銨25.0000g，定容至500ml。
二、主要儀器
萬分之一分析天平、UV-1800PC紫外可見分光光度計(jì)
三、試樣的制備
待測樣品混勻后裝入塑封袋4℃冷藏備用。
四、分析步驟
4.1 試樣溶液制備
稱取植物物組織2~5g（根據(jù)維生素C含量而定），加5ml草酸-EDTA溶液磨成勻漿，并轉(zhuǎn)入25ml容量瓶中，再用提取介質(zhì)沖洗研缽及研錘2~3次，沖洗液合并于25ml容量瓶中。取一部分勻漿經(jīng)3000g離心10min后保存。
4.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制
吸取VC標(biāo)準(zhǔn)溶液 0，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0分別置于50mL比色管中，用草酸-EDTA補(bǔ)充至5ml，加入偏磷酸-乙酸0.5ml，加入5%硫酸1ml，再加入5%鉬酸銨2ml。
加完試劑搖勻后，置30℃水浴中保溫15min，用蒸餾水稀釋到25 mL刻度，將溶液混勻，用空白管調(diào)零，在760nm波長下比色，記錄吸光度，以標(biāo)準(zhǔn)維生素C含量為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
4.3 樣品的測定
取1ml上清液與標(biāo)曲同法測定。若樣品顯色液中出現(xiàn)沉淀時(shí)，可過濾后比色，不影響測定結(jié)果。
五、結(jié)果計(jì)算
植物組織中維生素C的含量(mg)=
式中：
C——標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得樣品中維生素含量（mg）；
Vt——樣品提取液總體積(ml)；
Vs——測定時(shí)用樣品液體積（ml）；
FW——植物組織鮮重（g）。
【附注】
溫度對顯色有影響，顏色強(qiáng)度隨時(shí)間的延長而加深，因此顯色溫度和加入顯色劑的時(shí)間要求一致。