關鍵詞

高寒草原；全球變暖；低分子量有機酸；菌根；磷溶解細菌；植物養(yǎng)分獲取策略；P形態(tài)。

研究主題和背景

（1）背景：磷是高寒草地生態(tài)系統(tǒng)生產(chǎn)力的限制性因素，高寒草地生態(tài)系統(tǒng)對全球變暖十分敏感。相對于碳、氮循環(huán)而言，關于高寒草地生態(tài)系統(tǒng)變暖后植物有效磷的主要來源的認識極其有限。

（2）主題：青藏高原高寒草甸(海拔4635 m) 8年增溫試驗。地上生物量和地下生物量中磷的濃度顯著增加，表明增溫條件下植物對磷的活化和同化作用增強。

科學問題或科學假說

（1）科學問題：全球變暖背景下高寒草甸植物P獲取策略與土壤磷活化之間存在著怎樣的協(xié)同關系？

（2）科學假說：

A. 鈣結(jié)合態(tài)磷是高寒草甸堿性土壤長期增溫后植物有效磷的主要來源。

B. 鈣結(jié)合態(tài)磷的活化與氣候變暖下高效的植物P獲取策略有關，如釋放大量羧酸。

C. 鈣結(jié)合態(tài)磷的活化也與植物N獲取的策略有關。

材料與方法

本研究是在北麓河凍土觀測站，采用隨機區(qū)組實驗設計，五個區(qū)組，每個區(qū)組都有成對的控制和升溫處理。

A.?樣地與土壤樣品采集與保存

該實驗于2017年9月28日和2018年6月27日開展，用土鉆分別在0 - 10,10 - 20,20 - 30和30 - 50cm深度采集土壤樣品(直徑5厘米)；ANPP；蓋度，Mn、C、N、P的濃度。采用生長核心法對地下凈初級生產(chǎn)力(BNPP)進行測量。

B. DNA提取，PCR和DNA測序

使用PowerSoil從0.5 g土壤樣品中提取DNA，用納米滴分光光度計測定提取的DNA的質(zhì)量和數(shù)量。采用16S rRNA和Hiseq 2500 PE 100測序。

C.?土壤和植物分析

土壤樣品過2mm篩；pH；土壤有機C、N；氨態(tài)氮、硝態(tài)氮；MBP：氯仿熏蒸，使用0.5mol碳酸氫銨提取液浸提；酸性和堿性磷酸酶活性：對硝基苯酚磷酸鹽法；TP；P組分。

D.數(shù)據(jù)分析

原始FASTQ是環(huán)狀共識測序，經(jīng)過篩選、聚類和解復用，在生物標記平臺(https://international.biocloud.net/)上使用QIIME獲得操作分類單元(OTU)。根據(jù)Bergkemper et al.(2016)的數(shù)據(jù)集，本研究將與磷循環(huán)相關的細菌順序分配給OTUs。采用方差齊性檢驗對土壤性質(zhì)和磷形態(tài)、植物C、N、P、Mn、ACP、ALP、ANPP、BNPP、NPP以及與磷循環(huán)相關的微生物相對豐度進行了檢驗。然后對他們進行單因素方差分析，以檢驗增溫區(qū)和對照區(qū)之間的差異。三個變量殘差的正態(tài)性通過Q-Q圖進行檢驗。如果方差不均勻，則采用Kruskal Wallis檢驗分析這些變量的差異。采用Spearman相關分析檢驗土壤磷形態(tài)與生物變量的相關性。采用IBM SPSS Statistics 21軟件進行方差分析、Q-Q圖、Kruskal Wallis檢驗和Spearman相關分析。

結(jié)果

（1）?土壤磷和土壤性質(zhì)

土壤全磷平均濃度約為206 mg kg?1，鈣結(jié)合態(tài)P占41%-69%；有機磷占31%；殘渣P占2%；有機磷中高抗性有機磷占84%；植物有效磷僅占總磷的1.5%；鈣結(jié)合態(tài)磷含量在2017、2018增溫條件下顯著低于對照；而高抗性有機磷和殘渣磷則呈現(xiàn)出相反的趨勢。

（2）?植物性能

在增溫條件下莎草科、草本科和禾本科植物的ANPP、BNPP、NPP都呈增加趨勢；增溫后，植物生物量C、N、P總體呈上升趨勢，而地下生物量C、N變化不顯著。

莎草科和草本科植物的葉片[Mn]含量顯著高于禾本科植物；7-8年的持續(xù)增溫顯著增加了草本科植物的葉片[Mn]含量，而莎草的葉片[Mn]含量僅在增溫7年后有顯著增加。增溫對禾本科植物葉片[Mn]含量并沒有顯著影響。

討論

（1）氣候變暖增加鈣結(jié)合態(tài)磷的周轉(zhuǎn)：暖化使植物生物量磷顯著增加；地上生物量P與鈣結(jié)合態(tài)P呈負相關，由此可見，植物吸收了部分鈣結(jié)合態(tài)P。

地下生物量磷的增量大于地上生物量磷的增量。增溫通過增加高原某一部位的堿性磷酸酶(ALP)和酸性磷酸酶(ACP)活性，促進了有機磷的礦化。

（2）?土壤磷轉(zhuǎn)化的機制：相比不能釋放磷活化化合物的植物而言，向根際釋放大量羧酸鹽的植物具有更高的葉片[Mn]含量。

總結(jié)與思考

在高原中部的高寒草甸試驗增溫8年，土壤Ca-Pi顯著降低；Ca-Pi活化主要與植物磷獲取策略的增強作用有關；莎草和forbs分泌羧酸，而不形成獨特的特化根來調(diào)動鈣結(jié)合態(tài)磷；我們不排除其他養(yǎng)分獲取策略對植物磷吸收的貢獻，但強調(diào)了羧酸釋放型磷獲取植物策略在調(diào)動土壤磷有效性方面的主要作用，在長期變暖的高寒草地生態(tài)系統(tǒng)中，植物對磷的需求不斷增加；本研究結(jié)果表明，植物營養(yǎng)獲取策略可能決定了植物對營養(yǎng)貧乏高寒生態(tài)系統(tǒng)全球變化的響應，并可能支持高寒草甸的管理和恢復。