? 銨態(tài)氮是自然界氮元素的一種存在形態(tài),以銨根離子(NH4+)的形態(tài)存在和流通于土壤、植物、肥料和大氣中??梢耘c其他形式的氮元素在一定條件下相互轉(zhuǎn)化。今天栢暉給大家介紹一下如何通過2mol?L-1KCl浸提—靛酚藍比色法測定土壤中的銨態(tài)氮。
方法原理
2mol?L-1KCl溶液浸提土壤,把吸附在土壤膠體上的NH4+及水溶性NH4+浸提出來。土壤浸提液中的銨態(tài)氮在強堿性介質(zhì)中與次氯酸鹽和苯酚作用,生成水溶性染料靛酚藍,溶液的顏色很穩(wěn)定。在含氮0.05~0.5mol?L-1的范圍內(nèi),吸光度與銨態(tài)氮含量成正比,可用比色法測定。
試劑
(1)2mol?L-1KCl溶液 稱取149.1g氯化鉀(KCl,化學純)溶于水中,稀釋至1L。
(2)苯酚溶液 稱取苯酚(C6H5OH,化學純)10g和硝基鐵氰化鈉[Na2Fe(CN)5NO2H2O]100mg稀釋至1L。此試劑不穩(wěn)定,須貯于棕色瓶中,在4℃冰箱中保存。
(3)次氯酸鈉堿性溶液 稱取氫氧化鈉(化學純)10g、磷酸氫二鈉(Na2HPO4?7H2O, 化學純)7.06g、磷酸鈉(Na3PO4?12H2O, 化學純)31.8g和 52.5g?L-1次氯酸鈉(NaOCl,化學純,即含5%有效氯的漂白粉溶液)10mL溶于水中,稀釋至1L,貯于棕色瓶中,在4℃冰箱中保存。
(4)掩蔽劑 將400g?L-1的酒石酸鉀鈉(KNaC4H4O6?4H2O, 化學純)與100g?L-1的EDTA二鈉鹽溶液等體積混合。每100mL混合液中加入10 mol?L-1氫氧化鈉0.5mL。
(5)銨態(tài)氮(NH4+—N)標準溶液 稱取干燥的硫酸銨[(NH4)2SO4,分析純]0.4717g溶于水中,洗入容量瓶后定容至1L,制備成含銨態(tài)氮(N)100ug ?mL –1的貯存溶液;使用前將其加水稀釋20倍,即配制成含銨態(tài)氮(N)5ug ?mL –1的標準溶液備用。
分析步驟
(1)浸提 稱取適量土樣,準確到0.01g,置于150mL三角瓶中,按固液比1:5加入氯化鉀溶液,塞緊塞子,在振蕩機上振蕩1h。取出靜置,待土壤—氯化鉀懸濁液澄清后,吸取一定量上層清液進行分析。如果不能在24h內(nèi)進行,用濾紙過濾懸濁液,將濾液儲存在冰箱中備用。
(2)比色 吸取土壤浸出液2mL~10mL(含NH4+—N 2-25ug)放入50mL容量瓶中,用氯化鉀溶液補充至10mL,然后加入苯酚溶液5mL和次氯酸鈉堿性溶液5mL,搖勻。在20℃左右的室溫下放置1h后(注1),加掩蔽劑1mL以溶解可能產(chǎn)生的沉淀物,然后用水定容至刻度。2h后,用1cm比色槽在625nm波長處(或紅色濾光片)進行比色,讀取吸光度。
(3)工作曲線 分別吸取0.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00mL NH4+—N標準液于50mL容量瓶中,各加10mL氯化鈉溶液,同(2)步驟進行比色測定。
結(jié)果計算
式中:
c——從標曲查得顯色液中銨態(tài)氮的濃度,ug/ml;
V——顯色液的體積(mL);
ts——分取倍數(shù);
m——樣品質(zhì)量(g)。