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蔗糖含量的測(cè)定| 間苯二酚比色法、蒽酮法

日期: 2024-08-14
標(biāo)簽:

蔗糖含量的測(cè)定| 間苯二酚比色法、蒽酮法




間苯二酚比色法



Baihui Organisms
01
樣品提取

110℃烘箱15min,然后調(diào)至70℃烘干至恒重。實(shí)驗(yàn)材料各種植物葉片或種子)磨碎后,?秤取50mg樣品倒入10ml刻度離心管內(nèi)加入4ml 80%乙醇,至于80℃水浴中不斷攪拌40min?,離心,收集上清液,其殘?jiān)?/span>2ml 80%乙醇重復(fù)提2次,合并上清液。80%乙醇定容至10ml,過(guò)濾后取濾液測(cè)定。

02
制作標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)

取蔗糖標(biāo)準(zhǔn)液用80%乙醇稀釋成系列(0、10、20、30、40、60、80、100ug/ml)濃度的溶液。分別取0.4ml溶液,各自加入200ul 2mol/L NaOH,100℃煮沸5min,冷卻,加入2.8ml 30%HCl,0.8ml 0.1%間苯二酚,搖勻,80℃水浴反應(yīng)10min,冷卻后在480nm測(cè)定OD值,以0濃度管調(diào)零。繪制蔗糖濃度-OD值曲線(xiàn)。

03
顯色測(cè)定

取提取液0.4ml,按上述步驟進(jìn)行蔗糖含量的測(cè)定,讀取OD值,并從標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)得到提取液中的糖含量,然后再進(jìn)行計(jì)算樣品中的蔗糖含量。




蒽酮法



Baihui Organisms
01
實(shí)驗(yàn)原理

用堿性溶液同植物材料的可溶性糖提取液一起加熱,破壞其中的還原糖。然后用蒽酮法在較低的溫度下,測(cè)定蔗糖中的果糖部分。不含果糖苷的其他糖類(lèi)在較低的溫度下不與蒽酮顯色,材料中如含有其他帶有果糖苷的非還原糖(如:棉子糖、松三糖和土木香粉)對(duì)測(cè)定會(huì)有干擾,但是在有蔗糖存在的生物材料中這些糖幾乎是不存在的。

02
實(shí)驗(yàn)步驟

植物材料(植物的根、莖、葉)在110℃下殺青,經(jīng)70~80℃烘干研磨, 80%的乙醇,在80℃下提取半小時(shí),離心取上清液,共提取3次。合并上清液,加少許(約0.1克)活性炭脫色,并定容至10ml。根據(jù)蔗糖含量的多少吸取0.1~ 1.0ml于試管中,沸水浴中加熱濃縮至0.05~0.1ml (不要大于0.1ml,否則顯色時(shí)間要延長(zhǎng)),加入0.1ml30%的KOH,在沸水浴中放10min, 冷卻至室溫。加入3ml蒽酮試劑,40 ℃保溫10~15min, 在620nm測(cè)定吸光度值。同時(shí)取20~100ug蔗糖(在0.1ml體積中)于一系列試管中, 加入0.1ml30%KOH以同法顯色,做成標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。


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    2024 - 11 - 21
    土壤酶活性,是指土壤酶催化物質(zhì)轉(zhuǎn)化的能力。常以單位時(shí)間內(nèi)單位土壤的催化反應(yīng)產(chǎn)物量或底物剩余量表示。土壤酶活性既包括已積累于土壤中的酶活性,也包括正在增殖的微生物向土壤釋放的酶活性,它主要來(lái)源于土壤中的微生物,動(dòng)物和植物。土壤酶活的分類(lèi):已知的酶根據(jù)酶促反應(yīng)的類(lèi)型可分為六大類(lèi)。即水解酶、氧化還原酶、轉(zhuǎn)移酶、裂合酶、異構(gòu)酶和連接酶。1. 水解酶類(lèi): 酶促各種化合物中分子鍵的水解和裂解反應(yīng)。主要包括蔗糖酶、淀粉酶、纖維素酶、脲酶、蛋白酶、磷酸酶等。2.氧化還原酶類(lèi): 指催化兩分子間發(fā)生氧化還原作用的酶的總稱(chēng)。主要包括脫氫酶、過(guò)氧化氫酶、過(guò)氧化物酶、硝酸還原酶、亞硝酸還原酶等。3.轉(zhuǎn)移酶類(lèi): 指能夠催化除氫以外的各種化學(xué)官能團(tuán)從一種底物轉(zhuǎn)移到另一種底物的酶類(lèi),包括轉(zhuǎn)氨酶、果聚糖蔗糖酶、轉(zhuǎn)糖苷酶等。4.裂合酶類(lèi): 指催化由底物除去某個(gè)基團(tuán)而殘留雙鍵的反應(yīng)、或通過(guò)逆反應(yīng)將某個(gè)基團(tuán)加到雙鍵上去的反應(yīng)的酶的總稱(chēng),主要包括谷氨酸脫羧酶、天門(mén)冬氨酸脫羧酶等。5.異構(gòu)酶類(lèi): 酶促有機(jī)化合物轉(zhuǎn)化成它的異構(gòu)體的反應(yīng)。6.連接酶類(lèi): 是一種催化兩種大型分子以一種新的化學(xué)鍵結(jié)合一起的酶。測(cè)定方法分析:1.生化培養(yǎng)法作為酶活測(cè)定的重要方法之一,其又細(xì)分為分光光度法和滴定法。分光光度法:其基本原理是酶與底物混合經(jīng)培養(yǎng)后產(chǎn)生某種帶顏色的生成物,可在某一吸收波長(zhǎng)下產(chǎn)生特征性波峰,再用分光光度計(jì)測(cè)定設(shè)定的標(biāo)準(zhǔn)物及生成物的吸光值,由此確定酶活性的含量。滴定法:如果產(chǎn)物之一是自由的酸性物質(zhì)可用此法。如脂肪酶催化脂肪水解釋放出脂肪酸,脂肪酸的含量可以通過(guò)滴定進(jìn)行定量,通過(guò)計(jì)算反應(yīng)過(guò)程中脂肪酸的增加量就可以計(jì)算出脂肪酶的酶活力。2.熒光法熒光法是一種基于熒光信號(hào)的酶活測(cè)定方法,其原理是通過(guò)測(cè)量酶促反應(yīng)中熒光物質(zhì)的變化來(lái)推算酶活性。熒光法具有較高的靈敏度和選擇性,...
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    2024 - 11 - 14
    草原土壤儲(chǔ)存有439 Gt有機(jī)碳(SOC),在調(diào)節(jié)區(qū)域乃至全球氣候變化進(jìn)程中起著重要作用。然而,全球氣候變化背景下,大氣氮沉降的“施肥效應(yīng)”強(qiáng)烈地影響著土壤碳儲(chǔ)存。因此,明確高寒草甸SOC組分對(duì)氮、磷富集的響應(yīng)和潛在機(jī)制至關(guān)重要。西南民族大學(xué)高寒濕地生態(tài)保護(hù)研究創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)馬文明副研究員課題組依托青藏高原生態(tài)保護(hù)與畜牧業(yè)高科技研究示范基地和四川若爾蓋高寒濕地生態(tài)系統(tǒng)國(guó)家野外科學(xué)觀(guān)測(cè)研究站以紅原高寒草甸為研究對(duì)象進(jìn)行了長(zhǎng)期氮磷添加實(shí)驗(yàn)。采取隨機(jī)區(qū)組用尿素(CO(NH2)2)和過(guò)磷酸鈣(Ca(H2PO4)2·H2O)設(shè)計(jì)7個(gè)施肥梯度,氮肥施尿素(46.65%N),磷肥施過(guò)磷酸鈣(16%P2O5),施肥梯度分別為(0g尿素+0g過(guò)磷酸鈣)/m2(CK)、(10g尿素)/m2(N10)、(30g尿素)/m2(N30)、(10g過(guò)磷酸鈣)/m2(P10)、(30g過(guò)磷酸鈣)/m2(P30)(5g尿素+5g過(guò)磷酸鈣)/m2(NP10)、(15g尿素+15g過(guò)磷酸鈣)/m2(NP30)。研究發(fā)現(xiàn),氮和磷添加導(dǎo)致 SOC含量增加19.95%–36.66%;在相同施肥條件下,SOC含量隨著施肥梯度的增加而增加,在N30處理下達(dá)到最高;N和P添加促進(jìn)了脂肪族碳和芳香族碳的富集;與其他處理相比,NP30處理下SOC的穩(wěn)定性最高,而P10處理下SOC的穩(wěn)定性最低。表明N和P添加促進(jìn)了不穩(wěn)定碳的損失和穩(wěn)定碳的富集,從而提高了SOC的穩(wěn)定性,促進(jìn)了高寒草甸SOC的封存。總體而言,氮磷添加改變了高寒草甸土壤有機(jī)碳的理化性質(zhì)以及SOC的官能團(tuán)組成,進(jìn)而促進(jìn)了SOC積累。因此,在退化的生態(tài)系統(tǒng)中添加氮和磷可能是改善土壤碳固存的有效措施。該項(xiàng)研究近期以題為Nitrogen and phosphorus supply controls stability of soil organic carbon in...
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    栢暉生物特色檢測(cè)指標(biāo)——同位素的測(cè)定:更所檢測(cè)相關(guān)訊息so栢暉生物了解更多
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    2024 - 10 - 18
    栢暉文獻(xiàn)解讀原名:Canopy and understory nitrogen additions differently affect soil microbial residual carbon in a temperate forest譯名:林冠和林下氮素添加對(duì)溫帶森林土壤微生物殘?bào)w碳的影響不同期刊:Global Change BiologyIF:10.8發(fā)表日期:2024.7(網(wǎng)絡(luò)首發(fā)2024.7)第一作者:Yuanqi Chen,湖南科技大學(xué)1背景對(duì)森林的研究主要集中在林下加氮對(duì)微生物和微生物殘?bào)w的影響上,但對(duì)自然界氮沉積的主要途徑——植物冠層氮沉積的影響還沒(méi)有明確的探討。本文研究了10年N添加量(25和50 kg N ha?1yr?1)和模式(冠層和林下)對(duì)溫帶闊葉林土壤微生物殘?bào)w的影響。2假設(shè)(1)N的添加減輕了微生物對(duì)N的限制,增加了土壤中微生物生物量和微生物殘?bào)w碳;(2)冠層氮的截留減少了直接進(jìn)入土壤的氮量,所以林下N的添加對(duì)微生物殘?bào)w的影響比冠層N的添加更強(qiáng)。3材料與方法(1)本研究在中國(guó)河南省雞公山國(guó)家級(jí)自然保護(hù)區(qū)大別山國(guó)家級(jí)森林生態(tài)系統(tǒng)野外觀(guān)測(cè)研究站(北緯31°46′~ 31°52′,東經(jīng)114°01′~ 114°06′)進(jìn)行;(2)共隨機(jī)設(shè)4個(gè)區(qū)組。每個(gè)塊包含5個(gè)處理:CT(對(duì)照,不添加氮素)、CN25 (25 kg N / ha?1yr?1冠層添加氮素,低氮)、CN50 (50 kg N /ha?1yr?1冠層添加氮素,高氮)、UN25 (25 kg N / ha?1yr?1林下添加氮素,低氮)和UN50 (50 kg N / ha?1yr?1林下添加氮素,高氮);(3)施氮方式為NH4NO3溶液,4 ~ 10月每月施氮(每年7次)。為了增加樹(shù)冠N,在每個(gè)地塊的中心設(shè)置了一個(gè)35米高的塔,以支持灑水裝置和抽...
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案例名稱(chēng): 孵化中心
說(shuō)明: 栢暉生物科技有限公司項(xiàng)目孵化中心成立于2015.06.01日,研發(fā)領(lǐng)域涉及生物試劑耗材、儀器、新產(chǎn)品開(kāi)發(fā)及各生物科技服務(wù)類(lèi)項(xiàng)目等。自成立以來(lái),陸續(xù)吸引了大批專(zhuān)家教授加盟合作,并與全國(guó)數(shù)十家高校及知名企業(yè)建立了良好的合作關(guān)系。中心共有博士及以上學(xué)位骨干人員10人,專(zhuān)門(mén)負(fù)責(zé)公司新產(chǎn)品研發(fā)等工作,已成功研發(fā)出無(wú)線(xiàn)溫度監(jiān)控器及NO檢測(cè)試劑盒等產(chǎn)品(詳情見(jiàn)成功案例),另有細(xì)胞分選儀等三個(gè)項(xiàng)目正在積極孵化當(dāng)中。
2017 - 05 - 31
案例名稱(chēng): 孵化中心流程
說(shuō)明:
2017 - 07 - 17
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