? 果糖是一種單糖，是葡萄糖的同分異構(gòu)體，分子式為C6H12O6。它有一下一些特征：以游離狀態(tài)大量存在于水果的漿汁和蜂蜜中，還能與葡萄糖結(jié)合生成蔗糖；純凈的果糖為無色晶體，熔點為103～105℃,它不易結(jié)晶，通常為黏稠性液體，易溶于水、乙醇和乙醚。以下給大家分享下如何通過間苯二酚比色法檢測植物中的果糖。
一、實驗試劑
所有試劑除注明者外，均為分析純。
1.1 ?0.1%間苯二酚: 稱取0.1g間苯二酚溶液于100mL 95%乙醇溶液（棕色瓶內(nèi)保存）；
1.2 標(biāo)準(zhǔn)果糖溶液：稱取50mg烘至衡重的果糖，用80%乙醇配成1000ml溶液，得到質(zhì)量濃度為50ug/ml的果糖溶液；
1.3 80%乙醇；
1.4 濃鹽酸。
二、實驗儀器
分光光度計、恒溫水浴鍋、電子天平、烘箱、刻度離心管、帶塞試管、漏斗等。
三、試樣的制備
取風(fēng)干的實驗室待測樣品充分混勻后，按四分法縮減至 100g，粉碎，籽粒全部通過100目篩，裝入樣品瓶備用。
四、分析步驟
4.1 樣品提取
稱取50mg樣品倒入10ml刻度離心管內(nèi)加入4ml 80%乙醇，至于80℃水浴中不斷攪拌40min ，離心，收集上清液，其殘渣加2ml 80%乙醇重復(fù)提2次，合并上清液。80%乙醇定容至10ml，過濾后取濾液測定。
4.2 制作標(biāo)準(zhǔn)曲線
按照下表準(zhǔn)備6支試管，進行編號加試劑：
編號 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
果糖標(biāo)準(zhǔn)液/ml | 0 | 0.1 | 0.2 | 0.3 | 0.4 | 0.5 |
80%乙醇/ml | 1 | 0.9 | 0.8 | 0.7 | 0.6 | 0.5 |
HCl/ml | 1 | 1 | 1 | 1 | 1 | 1 |
間苯二酚/ml | 2 | 2 | 2 | 2 | 2 | 2 |
80℃水浴反應(yīng)10min，冷卻至室溫，在480nm處測定OD值，以0濃度管調(diào)零。繪制成果糖質(zhì)量濃度-OD 值曲線。
4.3 顯色測定
取植物提取液代替標(biāo)準(zhǔn)果糖溶液，按上述步驟進行果糖含量的測定，讀取?OD值，從標(biāo)準(zhǔn)曲線得到提取液總的果糖含量，然后再行計算樣品中的果糖含量。
五、結(jié)果計算
果糖含量（%）=【（a×V總×n）/（V測×m×106）】×100%
式中：
a——由標(biāo)曲計算所得還原糖含量，ug；
V總——樣品提取液總體積，ml；
n——為樣品提取液稀釋倍數(shù)
V測——顯色測定時吸取樣品液體積，ml；
m——樣品干重，g；
106——ug換算成g 。