一、試劑
所有試劑除注明者外，均為分析純。
1.1 磺基水楊酸：0.6克磺基水楊酸，定容至200ml
1.2 酸性茚三酮（現(xiàn)配）：3.75克茚三酮+90ml冰醋酸+36ml蒸餾水
1.3 甲苯
1.4 脯氨酸標(biāo)準(zhǔn)貯備液：在分析天平上精確稱取25mg脯氨酸，倒入小燒杯中內(nèi)，用少量蒸餾水溶解，然后倒入250ml容量瓶中，加蒸餾水定容至刻度，此標(biāo)準(zhǔn)液中每ml含脯氨酸100ug。?
二、主要儀器
萬分之一分析天平、水浴鍋、分光光度計
三、試樣的制備
取新鮮樣本剪碎充分混勻后，裝入樣本瓶放入4℃冷藏備用。
四、分析步驟
4.1 試樣溶液準(zhǔn)備
稱取鮮樣0.3g，加入5ml磺基水楊酸，加蓋，沸水浴10分鐘，過濾，吸取濾液2ml，加2ml冰醋酸和3ml酸性茚三酮，沸水浴40分鐘，冷卻，加入5ml甲苯，充分振蕩，靜止分層，取上層甲苯溶液于比色皿中，520nm下比色。
4.2 空白溶液制備
除不加試樣外，應(yīng)用的試劑和操作步驟同4.1
4.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制
吸取脯氨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液,0、0.5ml、1.0ml、1.5ml、2.0ml、2.5ml和3ml用蒸餾水定容至50ml容量瓶中，搖勻，各瓶中脯氨酸的濃度分別為0、1ug/ml、2ug/ml、3ug/ml、4ug/ml、5ug/ml及6ug/ml的系列標(biāo)準(zhǔn)濃度溶液，取7只試管分別取系列標(biāo)準(zhǔn)濃度的脯氨酸2ml，除不加試樣外，其余操作步驟同4.1
五、結(jié)果計算
脯氨酸含量（%）=【C×V/（W×Vt×106）】×100
式中：
C--為從校準(zhǔn)曲線或回歸方程求得的2ml測定液中脯氨酸含量，ug/2ml
V--為提取液體積，ml；
W--為稱取試樣鮮重的質(zhì)量，g；
Vt--為測量液體積，ml；
106、100--為換算因數(shù)。