? 銨態(tài)氮是自然界氮元素的一種存在形態(tài)，以銨根離子（NH4+）的形態(tài)存在和流通于土壤、植物、肥料和大氣中。可以與其他形式的氮元素在一定條件下相互轉(zhuǎn)化。今天栢暉給大家介紹一下如何通過2mol?L-1KCl浸提—靛酚藍比色法測定土壤中的銨態(tài)氮。
方法原理
2mol?L-1KCl溶液浸提土壤，把吸附在土壤膠體上的NH4+及水溶性NH4+浸提出來。土壤浸提液中的銨態(tài)氮在強堿性介質(zhì)中與次氯酸鹽和苯酚作用，生成水溶性染料靛酚藍，溶液的顏色很穩(wěn)定。在含氮0.05～0.5mol?L-1的范圍內(nèi)，吸光度與銨態(tài)氮含量成正比，可用比色法測定。
試劑
（1）2mol?L-1KCl溶液 稱取149.1g氯化鉀（KCl，化學(xué)純）溶于水中，稀釋至1L。
（2）苯酚溶液 稱取苯酚（C6H5OH，化學(xué)純）10g和硝基鐵氰化鈉[Na2Fe(CN)5NO2H2O]100mg稀釋至1L。此試劑不穩(wěn)定，須貯于棕色瓶中，在4℃冰箱中保存。
（3）次氯酸鈉堿性溶液 稱取氫氧化鈉（化學(xué)純）10g、磷酸氫二鈉（Na2HPO4?7H2O, 化學(xué)純）7.06g、磷酸鈉（Na3PO4?12H2O, 化學(xué)純）31.8g和 52.5g?L-1次氯酸鈉(NaOCl，化學(xué)純，即含5%有效氯的漂白粉溶液)10mL溶于水中，稀釋至1L，貯于棕色瓶中，在4℃冰箱中保存。
（4）掩蔽劑 將400g?L-1的酒石酸鉀鈉（KNaC4H4O6?4H2O, 化學(xué)純）與100g?L-1的EDTA二鈉鹽溶液等體積混合。每100mL混合液中加入10 mol?L-1氫氧化鈉0.5mL。
（5）銨態(tài)氮（NH4+—N）標準溶液 稱取干燥的硫酸銨[(NH4)2SO4，分析純]0.4717g溶于水中，洗入容量瓶后定容至1L，制備成含銨態(tài)氮（N）100ug ?mL –1的貯存溶液；使用前將其加水稀釋20倍，即配制成含銨態(tài)氮（N）5ug ?mL –1的標準溶液備用。
分析步驟
（1）浸提 稱取適量土樣，準確到0.01g，置于150mL三角瓶中，按固液比1:5加入氯化鉀溶液，塞緊塞子，在振蕩機上振蕩1h。取出靜置，待土壤—氯化鉀懸濁液澄清后，吸取一定量上層清液進行分析。如果不能在24h內(nèi)進行，用濾紙過濾懸濁液，將濾液儲存在冰箱中備用。
（2）比色 吸取土壤浸出液2mL～10mL(含NH4+—N 2-25ug)放入50mL容量瓶中，用氯化鉀溶液補充至10mL，然后加入苯酚溶液5mL和次氯酸鈉堿性溶液5mL，搖勻。在20℃左右的室溫下放置1h后（注1），加掩蔽劑1mL以溶解可能產(chǎn)生的沉淀物，然后用水定容至刻度。2h后，用1cm比色槽在625nm波長處（或紅色濾光片）進行比色，讀取吸光度。
（3）工作曲線 分別吸取0.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00mL NH4+—N標準液于50mL容量瓶中，各加10mL氯化鈉溶液，同（2）步驟進行比色測定。
結(jié)果計算
式中：
c——從標曲查得顯色液中銨態(tài)氮的濃度，ug/ml；
V——顯色液的體積(mL)；
ts——分取倍數(shù)；
m——樣品質(zhì)量（g）。