今天給大家分享一下如何用酸水解-蒸餾法測定土壤中有機氮組分(氨基酸態(tài)氮、氨基糖態(tài)氮、酸解銨態(tài)氮、酸解總氮)。操作步驟如下:·
1)土壤水解液的制備:
稱取適量過0.25mm篩的土壤樣品,放入具有磨口接頭的三角瓶中,加入2滴正辛醇和20ml和6ml的HCI,搖動瓶子使土壤和酸液充分混勻,將瓶子放入有溫控功能的遠紅外消煮爐中,在瓶口裝上有玻璃磨口接頭的冷凝管,接通冷凝水,打開電源開關,使溫度控制在120±3℃,在回流條件下使土壤--酸混合液慢慢沸騰12小時。
水解結束后,用中速藍帶濾紙將樣品趁熱過濾,濾液收集在100ml的燒杯中,用去離子水少量多次沖洗殘渣,使濾液體積達到約6Oml。將盛有濾液的燒杯放在碎冰塊中,借助PH計,逐滴慢慢加入5mol/L NaOH溶液,邊加邊攪拌,直到水解液的pH達5左右,再用
0.5mol/L的NaOH進行中和,使水解液的pH達6.5±0.1,用小漏斗把酸解液轉移到I00ml容量瓶中,定容至刻度。
2)酸解液中氮素形態(tài)的測定
(1)酸解液全氮的測定:
取樣前,先倒轉容量瓶幾次,使懸浮液均勻,并用末端較寬的移液管吸取5ml酸解液,放入消煮管中,加入0.5克定氮混合催化劑和2ml濃硫酸,380℃溫度下消煮1.5小時。冷卻后將消煮管連接到定氮儀上,加10ml 10mol/L NaOH,蒸餾約4分鐘,流出液用硼酸吸收,蒸餾結束后用0.0055 mol/L H2SO4滴定。
(2)銨態(tài)氮的測定
取10ml已中和的酸水解液,放入消煮管中,加入2mL 3.5%的MgO懸浮液,立即連接蒸餾裝置,蒸餾約2分鐘后滴定。
(3)氨基糖態(tài)氮的測定
取已中和的酸水解液10ml于消煮管中,加入10ml磷酸一硼酸緩沖液(PH11.2),連接蒸餾裝置,蒸餾4分鐘,滴定。此測定結果減去銨態(tài)氮,即為氨基糖態(tài)氮。
(4)氨基酸態(tài)氮的測定
取5ml已中和的酸水解液于消煮管中,加入1ml 0.5mol/L NaOH溶液,在沸水中加熱直到溶液減至2-3ml,取出冷卻,加入0.5g檸檬酸和0.1g茚三酮,將消煮管放回沸水浴中,加熱1分鐘后,旋轉消煮管(不放開水浴)3分鐘,再在水浴中保持9分鐘,取出冷卻后,加入10ml磷酸--硼酸緩沖液和1ml 5mol/L NaOH,蒸餾4分鐘,滴定。
(5)未知態(tài)氮= 水解總氮- (銨態(tài)氮+氨基糖態(tài)氮+氨基酸態(tài)氮)
(6)非水解氮= 土壤總氮-水解液總氮