土壤酶活性，是指土壤酶催化物質(zhì)轉(zhuǎn)化的能力。常以單位時(shí)間內(nèi)單位土壤的催化反應(yīng)產(chǎn)物量或底物剩余量表示。
土壤酶活性既包括已積累于土壤中的酶活性，也包括正在增殖的微生物向土壤釋放的酶活性，它主要來源于土壤中的微生物，動(dòng)物和植物。
土壤酶活的分類：
已知的酶根據(jù)酶促反應(yīng)的類型可分為六大類。即水解酶、氧化還原酶、轉(zhuǎn)移酶、裂合酶、異構(gòu)酶和連接酶。
1. 水解酶類：?酶促各種化合物中分子鍵的水解和裂解反應(yīng)。主要包括蔗糖酶、淀粉酶、纖維素酶、脲酶、蛋白酶、磷酸酶等。
2.氧化還原酶類：?指催化兩分子間發(fā)生氧化還原作用的酶的總稱。主要包括脫氫酶、過氧化氫酶、過氧化物酶、硝酸還原酶、亞硝酸還原酶等。
3.轉(zhuǎn)移酶類：?指能夠催化除氫以外的各種化學(xué)官能團(tuán)從一種底物轉(zhuǎn)移到另一種底物的酶類，包括轉(zhuǎn)氨酶、果聚糖蔗糖酶、轉(zhuǎn)糖苷酶等。
4.裂合酶類：?指催化由底物除去某個(gè)基團(tuán)而殘留雙鍵的反應(yīng)、或通過逆反應(yīng)將某個(gè)基團(tuán)加到雙鍵上去的反應(yīng)的酶的總稱，主要包括谷氨酸脫羧酶、天門冬氨酸脫羧酶等。
5.異構(gòu)酶類：?酶促有機(jī)化合物轉(zhuǎn)化成它的異構(gòu)體的反應(yīng)。
6.連接酶類：?是一種催化兩種大型分子以一種新的化學(xué)鍵結(jié)合一起的酶。
測定方法分析：
1.生化培養(yǎng)法
作為酶活測定的重要方法之一，其又細(xì)分為分光光度法和滴定法。
分光光度法：其基本原理是酶與底物混合經(jīng)培養(yǎng)后產(chǎn)生某種帶顏色的生成物，可在某一吸收波長下產(chǎn)生特征性波峰，再用分光光度計(jì)測定設(shè)定的標(biāo)準(zhǔn)物及生成物的吸光值，由此確定酶活性的含量。
滴定法：如果產(chǎn)物之一是自由的酸性物質(zhì)可用此法。如脂肪酶催化脂肪水解釋放出脂肪酸，脂肪酸的含量可以通過滴定進(jìn)行定量，通過計(jì)算反應(yīng)過程中脂肪酸的增加量就可以計(jì)算出脂肪酶的酶活力。
2.熒光法
熒光法是一種基于熒光信號的酶活測定方法，其原理是通過測量酶促反應(yīng)中熒光物質(zhì)的變化來推算酶活性。熒光法具有較高的靈敏度和選擇性，適用于低濃度底物或產(chǎn)物的檢測。
不過，熒光法需要特殊的熒光儀器和熒光標(biāo)記的底物或產(chǎn)物，通常這些產(chǎn)物需要人工合成，準(zhǔn)備起來較復(fù)雜，且熒光效率隨溫度而變化，故在整個(gè)測定過程中保持溫度恒定十分重要，成本較高且操作相對復(fù)雜。
熒光法實(shí)驗(yàn)操作流程：
3.酶聯(lián)免疫試劑盒檢測
ELISA試劑盒是一種用于定量或定性檢測樣品中特異性抗原或抗體的試劑組合。它通常由酶標(biāo)記抗體、酶底物、終止液、標(biāo)準(zhǔn)品、樣品稀釋液等組成。通過酶促反應(yīng)，將抗原-抗體反應(yīng)的特異性反應(yīng)轉(zhuǎn)化為可測量的光信號，從而實(shí)現(xiàn)對樣品中抗原或抗體的定量或定性分析。
4.微量法活性檢測試劑盒檢測
微量法和多數(shù)生化培養(yǎng)法的測定原理都是朗伯比耳定律: A=kbc，不同的是微量法既可以用可見分光光度計(jì)檢測，也可以用酶標(biāo)儀檢測；而可見分光光度法只能用可見分光光度計(jì)檢測。微量法有試樣量少、耗時(shí)短等優(yōu)點(diǎn)，同時(shí)也存在對溫度和時(shí)間要求嚴(yán)格，分析成本較高、底物難于溶解等其他和酶類免疫一樣的缺點(diǎn)。
5.電化學(xué)法
電化學(xué)法是一種新興的酶活性測定方法，通過酶對底物的水解作用，產(chǎn)生電活性物質(zhì)，然后通過電化學(xué)工作站測定電流或電位的變化，從而推算出酶活性。這種方法具有實(shí)時(shí)、在線監(jiān)測，高靈敏性，高選擇性的優(yōu)點(diǎn)，但需要專業(yè)的電化學(xué)設(shè)備和技術(shù)。且電化學(xué)法需要使用特殊的電極和電解質(zhì)溶液，操作較為繁瑣。
6.高效液相色譜法
高效液相色譜法則通過分離和檢測酶促反應(yīng)產(chǎn)生的產(chǎn)物來測定酶活性，具有高度的特異性和準(zhǔn)確性。高效液相色譜法可以應(yīng)用于多種酶活性的測定，且對于反應(yīng)條件的控制相對較為寬松。然而，高效液相色譜法需要使用昂貴的儀器和試劑，成本較高，需要專業(yè)的技術(shù)人員進(jìn)行操作和維護(hù)。
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