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本方法適用于酸性、中性土壤交換性鈣鎂的測定。以乙酸銨為土壤交換劑,浸出液中的交換性鈣、鎂,可直接用原子吸收分光光度法測定。測定時所用的鈣、鎂標準溶液中要同時加入同量的乙酸銨溶液,以消除基本效應。此外,在土壤浸出液中,還要加入釋放劑鍶(Sr),以消除鋁、磷和硅對鈣測定的干擾。01主要儀器和設備1.1 原子吸收分光光度計,鈣、鎂空心陰極燈1.2 離心機(3000r/min~4000r/min) 1.3 離心管(100 mL)02試劑和溶液本試驗方法所用試劑和水,除特殊注明外,均指分析純試劑和GB/T 6682中規(guī)定的二級水,所述溶液如未指明溶劑,均系水溶液。2.1 乙酸銨溶液[c(CH?COONH?)=1mol/L,pH7.0]稱取乙酸銨(CH?COONH?)77.09g溶于950 mL水中,用(1+1)氨水溶液和稀乙酸調(diào)節(jié)至pH7.0,加水稀釋到1L,搖勻。 2.2 (1+1)氨水溶液 2.3 (1+1)鹽酸溶液 2.4 氯化鍶溶液[ρ(SrCl?  6H?O)=30 g/L]       稱取氯化鍶(SrCl?·6H?O)30g溶于水,用水稀釋到1L,搖勻。2.5 pH10緩沖溶液      稱取67.5g氯化銨溶于無二氧化碳水中,加入新開瓶的570mL...
發(fā)布時間: 2024 - 08 - 09
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發(fā)布時間: 2021 - 10 - 29
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可溶性蛋白指可以以小分子狀態(tài)溶于水或其他溶劑的蛋白。通常在植物生理、微生物、食品加工等實驗中作為重要指標。如可溶性蛋白是植物抗旱性的重要指標之一。今天栢暉生物就給大家分享一下如何通過考馬斯亮藍染色法測定植物中的可溶性蛋白:“1試劑所有試劑除注明者外,均為分析純。1.1 考馬斯亮藍溶液配制:稱取100 mg考馬斯亮藍,溶于50ml 90%乙醇中,加入100ml 85%(W/V)磷酸,再用蒸餾水定容到1L。在過夜后過濾并貯于棕色瓶中,常溫下可保存一個月。1.2 90% 乙醇1.3 100 g/ml 牛血清蛋白(BSA)標準溶液:稱取10mg BSA定容至100 ml即為100 g/ml?;蚍Q取25 mg BSA加蒸餾水水溶解后定容至100 ml,再從中吸取40 ml蒸餾水定容至100ml。1.4 0.05 mol/LpH7.8磷酸配制:A母液,0.2 mol/L磷酸氫二鈉溶液:取Na2HPO4·12H2O (分子量358.14)35.85 g,用蒸餾水定容至500 ml。B母液,0.2 mol/L磷酸二氫鈉溶液:取NaH2PO4·2H2O (分子量156.01)1.5601 g,用蒸餾水定容到50 ml。1.5 0.05M pH7.8磷酸:分別取A母液228.75ml,B母液21.25ml,用蒸餾水定容至1000ml。“2主要儀器萬分之一分析天平、紫外可見分光光度計、離心機“3試樣的制備取風干的實驗室待測樣品充分混勻后,籽粒全部通過 0.25mm(秸稈通過 0.5mm)孔徑篩,裝入樣品瓶備用。“4分析步驟4.1 試樣溶液制備樣品提?。喝□r樣0.2—0.5g,用蒸餾水或緩沖液研磨成勻漿后,3000r/min—4000r/min離心10min,上清液備用。4.2 標準曲線繪制取6支具塞試管,依次加入標液0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml,然后用蒸餾水補充至1ml,再向各管中加入5ml考馬斯亮藍試劑,5min左右,以0號試管為空白對照,在595nm下比色測定吸光度,以蛋白質(zhì)含量為橫坐標,以吸光度為縱坐標繪制標準曲線。4.3 樣品的測定吸取樣品提取液1.0ml(視蛋白質(zhì)含量適當稀釋),放入試管中(每個樣品重復兩次),加入5ml考馬斯亮藍試劑,搖勻,放置2min待反應完成,在595nm下比色,測定吸光度,并通過標準曲線查蛋白質(zhì)含量。“5結果計算式中:C—查標準曲線值,g;Vt—提取液總體積,ml;WF—樣品鮮重,g;Vs—測定時加樣量,ml所得結果應保留小數(shù)點后三位
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發(fā)布時間: 2021 - 10 - 08
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植物體經(jīng)灼燒后其中的水分被全部除去,干物質(zhì)被炭化分解,蕞后的殘留物稱為“粗灰分”。植物干物質(zhì)中粗灰分的含量,隨植物種類、品種、不同器官和部位、生育期以及生長環(huán)境和其他農(nóng)業(yè)技術措施等因素而變動,但一般為2~7%,平均約5%。測定粗灰分的含量,可以了解各種植物在不同生育期和不同器官中養(yǎng)分吸收和累積狀況以及土壤、施肥、氣候、栽培管理等因素對植物灰分含量變化的影響。并且也是農(nóng)產(chǎn)品及其加工產(chǎn)品的品質(zhì)檢定項目之一。今天栢暉生物給大家整理了如何通過灼燒法測定植物粗灰分:一、方法概要??? ????稱量一定質(zhì)量的試樣,在550℃~600℃高溫下灼燒。是有機化合物分解揮發(fā),礦物成分轉(zhuǎn)化為氧化物或碳酸鹽,統(tǒng)稱粗灰分,用重量法測定。?二、主要儀器萬分之一天平、瓷坩堝、干燥劑、馬弗爐三、試樣的制備取風干的實驗室待測樣品充分混勻后,按四分法縮減至 100g,粉碎,籽粒全部通過 0.25mm(秸稈通過 0.5mm)孔徑篩,裝入樣品瓶備用。四、操作步驟? ????將坩堝放入馬弗爐中,于550℃下灼燒30min,待爐降溫至200℃后,將坩堝移入干燥器中,冷卻至室溫后稱量(M0)4.2 稱取5.0g試樣于已恒重的坩堝中稱重(M1)4.3 將其移入預先加熱到550℃的馬弗爐中灼燒3h,直至試樣完全灰化,無黑色炭粒,斷電,立即取出坩堝,室溫冷卻2~3min,干燥器內(nèi)平衡30min,稱重(M2)五、結果計算? ????粗灰分(g·kg-1) = (M2-M0)/(M1-M0)×1000式中:??????粗灰分—植物粗灰分????????????M0--瓷坩堝質(zhì)量,g?;???????????M1--瓷坩堝加試樣重量,g?;???????????M2--瓷坩堝加粗灰分質(zhì)量,g;1000--換算因數(shù)。
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發(fā)布時間: 2021 - 09 - 26
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實驗材料:植物樣:青稞種子實驗步驟:01:樣品提取準確稱取0.5g經(jīng)研磨的樣本,放在100ml的燒杯中,先以少量蒸餾水調(diào)成糊狀,然后加50ml蒸餾水,攪勻,置于50℃恒溫水浴中保溫20min,使還原糖浸出。離心或過濾,用20ml蒸餾水洗殘渣,再離心或過濾,將兩次離心的上清液或濾液全部收集在100ml的容量瓶中,用蒸餾水定容至刻度,混勻,作為還原糖待測液。02:制作標準曲線取7支具有25ml刻度的血糖管或刻度試管,編號,按比例精確加入濃度為1mg/ml的葡萄糖標準液和3,5-二硝基水楊酸試劑。將各管搖勻,在沸水浴中加熱5min,取出后立即放入盛有冷水的燒杯中冷卻至室溫,再以蒸餾水定容至25ml刻度處,用橡皮塞塞住管口,顛倒混勻(如用大試管,則向每管加入21.5ml蒸餾水,混勻)。在540nm波長下,用0號管調(diào)零,分別讀取1~6號管的消光值。以消光值為縱坐標,葡萄糖mg為橫坐標,繪制標準曲線,求得直線方程。03:顯色測定取3支25ml刻度試管,編號,分別加入還原糖待測液2ml,3,5-二硝基水楊酸試劑1.5ml,其余操作均與制作標準曲線相同,測定各管的吸光值。04:數(shù)據(jù)處理  分別在標準曲線上查出相應還原糖mg數(shù),計算還原糖百分含量?!?#160; ◆  ◆其他還原糖檢測方法1、DNS法測各種還原糖標準曲線原理:3,5-二硝基水楊酸(3,5-dinitrosalicylic acid, DNS)在堿性條件下與還原糖的還原末端反應生成橙黃至棕紅色的氨基化合物,在一定范圍內(nèi),還原糖的量和反應液的顏色強度呈正比例關系。  引伸:植物還原糖檢測試劑盒是還原糖在堿性條件下被氧化成糖酸,3,5-二硝基水楊酸被還原為棕紅色的氨基化合物。在一定范圍內(nèi),還原糖的量與棕紅色產(chǎn)物的顏色深淺程度呈一定比例關系。測定棕紅色物質(zhì)的吸光度,該吸光度值與還原糖含量呈線性關系,利用比色法和標準曲線測得樣品中的還原糖的含量。2、鐵氰化鉀法根據(jù)蔗糖的非還原性,用生成物(葡萄糖和果糖)能夠還原菲林溶液中的銅,再根據(jù)生成的氧化亞銅的量求出糖的含量。先制備還原糖待測混合液,通過0.1N的硫代硫酸鈉滴定,達到當量點前,注入淀粉指示劑滴定至藍色消失。土壤的轉(zhuǎn)化酶活性,以單位土重的0.1N硫代硫酸鈉毫升數(shù)(對照與試驗測定的差)表示。測各種還原糖標準曲線原理:鐵氰化鉀[K3Fe(CN)6〕本身為黃色(吸收峰在420nm)左右,而與還原糖反應可生成無色的亞鐵氰化鉀[K4 Fe( CN)6 ],在一定范圍內(nèi),還原糖的量和反應液的顏色...
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發(fā)布時間: 2021 - 09 - 26
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一般意義上的粗脂肪是指將經(jīng)前處理的、分散且干燥的樣品用乙醚或石油醚等溶劑回流提取,使樣品中的脂肪進入溶劑中,回收溶劑后所得到的殘留物。今天我們就來分解一下如何通過殘余法檢測粗脂肪:一、試劑所有試劑除注明者外,均為分析純。無水乙醚二、主要儀器萬分之一天平、索氏提取器三、試樣的制備取風干的實驗室待測樣品充分混勻后,按四分法縮減至100g,粉碎,裝入樣品瓶備用。四、分析步驟4.1 按規(guī)定稱取試樣(M)(準確至0.0001 g),用濾紙包好,在105 C烘箱中干燥3 h取出,在干燥器中冷卻,稱重(M1)。4.2 將樣包裝人索氏脂肪抽提器抽提筒中,再倒人無水乙醚,完全浸泡樣包,連接好索氏抽提器各部分,浸泡至少16h。4.3 將浸泡后無水乙醚放入抽提瓶中,在抽提瓶中放人幾粒沸石,然后,往抽提瓶中倒入無水乙醚使之完全浸泡樣包,連接好儀器各部分,接通冷凝水,在70~80 C水浴上加熱,使乙醚回流,控制乙醚回流次數(shù)為8次/h,即乙醚回滴速度為120~ 150滴/min,抽提6 h。4.4 抽提完畢,取出樣包,置樣包于通風處使乙醚揮發(fā)。將樣包放人105C烘箱中干燥2 h,取出,在干燥器中冷卻,稱重(M2)。五、結果計算脂肪含量=【(M1-M2)/M】x100%式中:M1--為第一次烘干的重量,g;M2--為第二次烘干的重量,g;100%--為換算因數(shù);M--為稱取試樣的質(zhì)量,g。
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發(fā)布時間: 2021 - 09 - 24
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今天給大家分享一下如何通過比色法對Vc的含量進行測定,如下:一、試劑所有試劑除注明者外,均為分析純。1. Vc標準液:準確稱取抗壞血酸0.1000g,用配好的草酸-EDTA定容至100ml。2. 草酸-EDTA:稱取含結晶水的草酸6.3000g,EDTA 0.0584g,充分溶解后定容至1000ml。3. 偏磷酸-乙酸:稱取15.0000g偏磷酸于40ml乙酸中,定容至500ml,用濾紙過濾,取濾液備用。4. 5%H2SO4:吸取5ml硫酸稀釋至100ml。5.  5%鉬酸銨:準確稱取鉬酸銨25.0000g,定容至500ml。二、主要儀器萬分之一分析天平、UV-1800PC紫外可見分光光度計三、試樣的制備待測樣品混勻后裝入塑封袋4℃冷藏備用。四、分析步驟4.1 試樣溶液制備稱取植物物組織2~5g(根據(jù)維生素C含量而定),加5ml草酸-EDTA溶液磨成勻漿,并轉(zhuǎn)入25ml容量瓶中,再用提取介質(zhì)沖洗研缽及研錘2~3次,沖洗液合并于25ml容量瓶中。取一部分勻漿經(jīng)3000g離心10min后保存。4.2 標準曲線繪制吸取VC標準溶液 0,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0分別置于50mL比色管中,用草酸-EDTA補充至5ml,加入偏磷酸-乙酸0.5ml,加入5%硫酸1ml,再加入5%鉬酸銨2ml。加完試劑搖勻后,置30℃水浴中保溫15min,用蒸餾水稀釋到25 mL刻度,將溶液混勻,用空白管調(diào)零,在760nm波長下比色,記錄吸光度,以標準維生素C含量為橫坐標,吸光度為縱坐標,繪制標準曲線。4.3 樣品的測定取1ml上清液與標曲同法測定。若樣品顯色液中出現(xiàn)沉淀時,可過濾后比色,不影響測定結果。五、結果計算植物組織中維生素C的含量(mg)=式中:C——標準曲線上查得樣品中維生素含量(mg);Vt——樣品提取液總體積(ml);Vs——測定時用樣品液體積(ml);FW——植物組織鮮重(g)?!靖阶ⅰ繙囟葘︼@色有影響,顏色強度隨時間的延長而加深,因此顯色溫度和加入顯色劑的時間要求一致。
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