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本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了去除雜質(zhì)、風(fēng)干、烘干、磨碎等制備森林植物及森林枯枝落葉層樣品的方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于森林植物及森林枯枝落葉層樣品的制備。樣品制備流程 1、去除雜質(zhì)  植物樣品,如果是葉子,要用清潔的濕紗布揩擦干凈,如果是樹皮或根,則將其表面的干土用刷子把它刷凈;微量元素分析用的樣品須用1~3g/L去垢劑溶液洗滌,再用水淋凈。森林枯枝落葉層樣品要挑盡混在其間的石礫、土塊等非有機物質(zhì)。 2、風(fēng)干和烘干  把揩擦干凈的植物新鮮樣品及森林枯枝落葉層樣品放在通風(fēng)的地方,鋪成薄層,并經(jīng)常翻動使盡快風(fēng)干,切不可使其霉變,風(fēng)干后裝入布口袋中。在有烘箱的條件下,可把擦干凈的植物新鮮樣品及森林枯枝落葉層樣品松松地放入烘箱中,一般分兩步干燥:先將植物新鮮樣品在80~90℃鼓風(fēng)烘箱中烘15~ 30 min(松軟組織烘15 min,致密堅實的組織烘30 min),然后降溫至65℃,森林枯枝落葉層樣品可直接 在65℃烘干。干燥時間須視新鮮樣品含水量而定,通常為12~14 h。然后裝入布口袋中。 3、磨碎  樣品磨碎前需在65℃烘箱中烘到發(fā)脆,然后再進行磨碎處理。如果只測定氮、磷、鉀、鈉、鈣、鎂,則可用植物粉碎機磨碎,并通過2mm篩孔,然后裝于磨口廣口瓶中備用。若分析項目除以上內(nèi)容外,還要測定微量元素,則樣品可用不銹鋼剪刀剪細(xì)或放...
發(fā)布時間: 2024 - 09 - 10
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發(fā)布時間: 2022 - 03 - 04
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銨態(tài)氮是自然界氮元素的一種存在形態(tài),以銨根離子(NH4+)的形態(tài)存在和流通于土壤、植物、肥料和大氣中??梢耘c其他形式的氮元素在一定條件下相互轉(zhuǎn)化。今天栢暉給大家介紹一下如何通過2mol?L-1KCl浸提—靛酚藍(lán)比色法測定土壤中的銨態(tài)氮。方法原理2mol?L-1KCl溶液浸提土壤,把吸附在土壤膠體上的NH4+及水溶性NH4+浸提出來。土壤浸提液中的銨態(tài)氮在強堿性介質(zhì)中與次氯酸鹽和苯酚作用,生成水溶性染料靛酚藍(lán),溶液的顏色很穩(wěn)定。在含氮0.05~0.5mol?L-1的范圍內(nèi),吸光度與銨態(tài)氮含量成正比,可用比色法測定。試劑(1)2mol?L-1KCl溶液 稱取149.1g氯化鉀(KCl,化學(xué)純)溶于水中,稀釋至1L。(2)苯酚溶液 稱取苯酚(C6H5OH,化學(xué)純)10g和硝基鐵氰化鈉[Na2Fe(CN)5NO2H2O]100mg稀釋至1L。此試劑不穩(wěn)定,須貯于棕色瓶中,在4℃冰箱中保存。(3)次氯酸鈉堿性溶液 稱取氫氧化鈉(化學(xué)純)10g、磷酸氫二鈉(Na2HPO4?7H2O, 化學(xué)純)7.06g、磷酸鈉(Na3PO4?12H2O, 化學(xué)純)31.8g和 52.5g?L-1次氯酸鈉(NaOCl,化學(xué)純,即含5%有效氯的漂白粉溶液)10mL溶于水中,稀釋至1L,貯于棕色瓶中,在4℃冰箱中保存。(4)掩蔽劑 將400g?L-1的酒石酸鉀鈉(KNaC4H4O6?4H2O, 化學(xué)純)與100g?L-1的EDTA二鈉鹽溶液等體積混合。每100mL混合液中加入10 mol?L-1氫氧化鈉0.5mL。(5)銨態(tài)氮(NH4+—N)標(biāo)準(zhǔn)溶液 稱取干燥的硫酸銨[(NH4)2SO4,分析純]0.4717g溶于水中,洗入容量瓶后定容至1L,制備成含銨態(tài)氮(N)100ug ?mL –1的貯存溶液;使用前將其加水稀釋20倍,即配制成含銨態(tài)氮(N)5ug ?mL –1的標(biāo)準(zhǔn)溶液備用。分析步驟(1)浸提 稱取適量土樣,準(zhǔn)確到0.01g,置于150mL三角瓶中,按固液比1:5加入氯化鉀溶液,塞緊塞子,在振蕩機上振蕩1h。取出靜置,待土壤—氯化鉀懸濁液澄清后,吸取一定量上層清液進行分析。如果不能在24h內(nèi)進行,用濾紙過濾懸濁液,將濾液儲存在冰箱中備用。(2)比色 吸取土壤浸出液2mL~10mL(含NH4+—N 2-25ug)放入50mL容量瓶中,用氯化鉀溶液補充至10mL,然后加入苯酚溶液5mL和次氯酸鈉堿性溶液5mL,搖勻。在20℃左右的室溫下放置1h后(注1),加掩蔽劑1mL以溶解可能產(chǎn)生的沉淀物,然后用水定容至刻度。2h后,用1cm比色槽在625nm波長處(或紅色濾光片)進行比色,讀取吸光度。(3...
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發(fā)布時間: 2022 - 02 - 11
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超氧化物歧化酶(SOD)是生物體系中抗氧化酶系的重要組成成員,廣泛分布在微生物、植物和動物體內(nèi)。其是在上個世紀(jì)末才被發(fā)現(xiàn),可以說是生物醫(yī)學(xué)研究史上的一項重大成果,于人類生命研究具有極其重要的意義。今天我們就給大家分享一下如何通過比色法測定植物酶活SOD。圖片來源于網(wǎng)絡(luò)一、試劑所有試劑除注明者外,均為分析純。1.1 磷酸緩沖液:A液:0.2M的KH2PO4溶液?分析純KH2PO4? 27.216克,用蒸餾水定容至1000毫升。?B液:0.2M的K2HPO4溶液?分析純K2HPO4?3H2O?45.644克,用蒸餾水定容至1000毫升?;?A液:0.2M的NaH2PO4溶液?分析純NaH2PO4?2H2O? 31.21克,用蒸餾水定容至1000毫升。?B液:0.2M的Na2HPO4溶液? 分析純Na2HPO4?12H2O?71.64克,用蒸餾水定容至1000毫升。1.2 母液的配制:?(1)0.5M?磷酸緩沖液(PH=7.8):A液21.25ml+B液228.25ml定容至1000ml;?(2)130mM?Met(甲硫氨酸):取1.9399克Met?用磷酸緩沖液(PH=7.8)定容至100ml;?(3)750μM四氮唑藍(lán)(NBT):取0.06133gNBT用磷酸緩沖液(PH=7.8)定容至100ml(避光保存);?(4)100μM?EDTA-Na2:取0.0372g?EDTA-Na2用磷酸緩沖液(PH=7.8)定容至1000ml;?(5)20μM?FD?(核黃素):0.00753gFD用磷酸緩沖液(PH=7.8)定容至1000ml(現(xiàn)配現(xiàn)用)。?1.3 SOD反應(yīng)液:?磷酸緩沖液(PH=7.8):Met:NBT:EDTA-Na2:核黃素(FD):H2O的比例為15:3:3:3:3:2.5,按母液順序配制。?二、主要儀器萬分之一分析天平、紫外分光光度計、醫(yī)用離心機、研缽三、試樣的制備取新鮮樣本剪碎充分混勻后,裝入樣本瓶放入4℃冷藏備用。四、分析步驟4.1 酶液的制備:?稱取鮮樣0.5g放入研缽中,加5毫升PH=7.8的磷酸緩沖液,冰浴研磨,勻漿倒入離心管中,冷凍離心20分鐘(10000×g),上清液(酶液)倒入試管中,置于0~4℃下保存待用。?4.2 SOD的測定?取型號相同的試管,吸取20ul的酶液,加入3ml反應(yīng)液,4000Lux照光(多用為環(huán)形日光燈的光照培養(yǎng)箱)30分鐘(盡量做到照光情況一致)4.3 空白與對照的制備同時取四支試管,三支做對照(CK),一支做空白(不加酶液,以緩沖液代替);空白置暗處,對照(CK)與酶液同至于4000Lux條件下照光3...
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發(fā)布時間: 2021 - 12 - 31
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速效鉀是土壤中可被植物吸收利用的組分,具有促進植物淀粉和糖分合成、增加油脂和蛋白質(zhì)含量、增強作物抗逆性等重要作用。今天栢暉小編整理了如何通過醋酸銨—火焰光度計法來測定土壤中的速效鉀~一、試劑(1)中性1.0mol/L NH4OAc溶液:稱77.09 g NH4OAc溶于近1升水中,用稀HOAc或NH4OH調(diào)節(jié)至pH7.0,用水定容至1升。(2)K標(biāo)準(zhǔn)溶液:稱取0.1907 g KCLmol/L NH4OAc溶液中,完全溶解后用1mol/L NH4OAc溶液定容至1升,即為含100 mg/L K的NH4OAc溶液。用時分別吸取此100mg/L K標(biāo)準(zhǔn)液0,2,5,10,20,40 ml放入100 ml容量瓶中,用1mol/L NH4OAc定容,即得0,2,5,10,20,40 mg/L K標(biāo)準(zhǔn)系列溶液。二、主要儀器1/1000天平、振蕩機、火焰光度計、三角瓶(250ml,100ml)、漏斗(60ml)、濾紙、坐標(biāo)紙、角匙、吸耳球、移液管(50ml)三、試樣的制備取風(fēng)干的實驗室待測樣品充分混勻后,取待測樣品充分混勻后,按四分法縮減至 100g,粉碎,然后全部通過18目孔徑篩,裝入樣品袋備用。四、分析步驟稱取風(fēng)干土樣(1mm孔徑)5.00 g于150ml三角瓶中,加1mol/L NH4OAc溶液50.0ml(土液比為1:10),用橡皮塞塞緊,在20—25℃下振蕩30分鐘用干濾紙過濾,濾液與鉀標(biāo)準(zhǔn)系列溶液一起在火焰光度計上進行測定,在方格紙上繪制成曲線,根據(jù)待測液的讀數(shù)值查出相對應(yīng)的mg/L數(shù),并計算出土壤中速效鉀的含量。五、結(jié)果計算式中:C—待測液濃度mg/L;m—風(fēng)干土重;V—加入浸提劑毫升數(shù);
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發(fā)布時間: 2021 - 12 - 27
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之前,栢暉生物給大家整理分享過粗脂肪、粗灰分等指標(biāo)的測定方法,今天咱們來看看如何通過殘重法測定植物中的粗纖維。試驗流程如下:一、試劑所有試劑除注明者外,均為分析純。1.1 1.25%硫酸:取相對密度1.84的濃硫酸13.0ml 加水稀釋至1L。1.2 1.25%氫氧化鉀溶液二、主要儀器萬分之一分析天平、電熱板、錐形瓶三、試樣的制備取風(fēng)干的實驗室待測樣品充分混勻后,按四分法縮減至 100g,粉碎,籽粒全部通過20目篩,裝入樣品瓶備用。四、分析步驟4.1 稱取干燥樣品1-3.0g,移入500ml錐形瓶中,加入200ml煮沸的1.25%硫酸,加熱使其微沸,保持體積恒定,維持30min,期間每隔5min搖動錐形瓶一次,充分混合瓶內(nèi)物質(zhì)。4.2 去下錐形瓶后用帶有已知質(zhì)量濾紙的漏斗過濾,并用熱蒸餾水沖洗錐形瓶及漏斗,直至濾液用石蕊試紙測定為中性反應(yīng)為止。4.3 再用200ml煮沸的1.25%氫氧化鉀溶液將濾紙上的沉淀物完全洗入原錐形瓶內(nèi),將其加熱至沸騰再繼續(xù)30min,操作同4.1。4.4 煮沸后冷卻,用原來所用已知質(zhì)量的濾紙,用蒸餾水沖洗2~3次,再用乙醇和乙醚各洗滌一次。4.5 將濾紙和沉淀在100~105℃的烘箱中烘至恒重并稱重。?五、結(jié)果計算粗纖維含量(%)=(M1/M2)×100%式中:M1--為烘干后殘余物的質(zhì)量,g;M2--為試樣的質(zhì)量,;100--換算因數(shù)。來源:栢暉生物整理。
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發(fā)布時間: 2021 - 12 - 07
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一、試劑所有試劑除注明者外,均為分析純。1.1 磺基水楊酸:0.6克磺基水楊酸,定容至200ml1.2 酸性茚三酮(現(xiàn)配):3.75克茚三酮+90ml冰醋酸+36ml蒸餾水1.3 甲苯1.4 脯氨酸標(biāo)準(zhǔn)貯備液:在分析天平上精確稱取25mg脯氨酸,倒入小燒杯中內(nèi),用少量蒸餾水溶解,然后倒入250ml容量瓶中,加蒸餾水定容至刻度,此標(biāo)準(zhǔn)液中每ml含脯氨酸100ug。 二、主要儀器萬分之一分析天平、水浴鍋、分光光度計三、試樣的制備取新鮮樣本剪碎充分混勻后,裝入樣本瓶放入4℃冷藏備用。四、分析步驟4.1 試樣溶液準(zhǔn)備稱取鮮樣0.3g,加入5ml磺基水楊酸,加蓋,沸水浴10分鐘,過濾,吸取濾液2ml,加2ml冰醋酸和3ml酸性茚三酮,沸水浴40分鐘,冷卻,加入5ml甲苯,充分振蕩,靜止分層,取上層甲苯溶液于比色皿中,520nm下比色。4.2 空白溶液制備除不加試樣外,應(yīng)用的試劑和操作步驟同4.14.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制吸取脯氨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液,0、0.5ml、1.0ml、1.5ml、2.0ml、2.5ml和3ml用蒸餾水定容至50ml容量瓶中,搖勻,各瓶中脯氨酸的濃度分別為0、1ug/ml、2ug/ml、3ug/ml、4ug/ml、5ug/ml及6ug/ml的系列標(biāo)準(zhǔn)濃度溶液,取7只試管分別取系列標(biāo)準(zhǔn)濃度的脯氨酸2ml,除不加試樣外,其余操作步驟同4.1五、結(jié)果計算脯氨酸含量(%)=【C×V/(W×Vt×106)】×100式中:C--為從校準(zhǔn)曲線或回歸方程求得的2ml測定液中脯氨酸含量,ug/2mlV--為提取液體積,ml;W--為稱取試樣鮮重的質(zhì)量,g;Vt--為測量液體積,ml;106、100--為換算因數(shù)。
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